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Bak和Bcl-xl在豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜的表达及凋亡

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内容提示: 万方数据 J o哪al0f M edi cal Fom mV01.28N 哦£—丛塑h20哩高度近视又称病理性近视,是一种进行性发展的眼病,随着病程发展,眼轴延长,近视度数加深,并伴脉络膜萎缩及眼底退行性改变。485868.com_【官方首页】-澳门金沙形觉剥夺学说的提出及FDM 动物模型的建立,对近视发病机制的研究起了推动性作用。研究表明高度近视伴随着视网膜细胞的变性,是许多神经系统及视网膜变性疾病中神经细胞死亡的重要机制¨ 以1。Bcl 一2基因蛋白家族,其成员包括Bcl 一2、Ba) 【、Bal (、Bcl 一】【l 等在细胞凋亡的调控中起着重要的作用。本研究采用豚鼠形觉剥夺性近视眼模型,模拟人类高度近视眼底改变,用TuN EL技术...

文档格式:PDF| 浏览次数:1| 上传日期:2015-08-18 21:07:18| 文档星级:
万方数据 J o哪al0f M edi cal Fom mV01.28N 哦£—丛塑h20哩高度近视又称病理性近视,是一种进行性发展的眼病,随着病程发展,眼轴延长,近视度数加深,并伴脉络膜萎缩及眼底退行性改变。485868.com_【官方首页】-澳门金沙形觉剥夺学说的提出及FDM 动物模型的建立,对近视发病机制的研究起了推动性作用。485868.com_【官方首页】-澳门金沙研究表明高度近视伴随着视网膜细胞的变性,是许多神经系统及视网膜变性疾病中神经细胞死亡的重要机制¨ 以1。Bcl 一2基因蛋白家族,其成员包括Bcl 一2、Ba) 【、Bal (、Bcl 一】【l 等在细胞凋亡的调控中起着重要的作用。本研究采用豚鼠形觉剥夺性近视眼模型,模拟人类高度近视眼底改变,用TuN EL技术及免疫组化法检测视网膜细胞的凋亡和Bak、Bcl —d的表达。1材料与方法1.1动物模型和分组豚鼠40只( 郑州大学医学院动物中心提供) ,用半透明塑料眼罩( 无水乙醇内盖制成) 遮盖豚鼠右眼,左眼开放作为对照眼,建立形觉剥夺性近视模型。分为A组( 遮盖8周) 20只,B组( 遮盖12周) 20只,室内饲养,室温保持25℃,自然昼夜周期。1.2方法1.2.1屈光度测量检查前1h双眼滴l %复方托品酰胺滴眼液4次,1m 距离带状光检影,散光以等效球镜表示。实验前后双眼各测量3次,取其平均值。腹腔注射l O %水合氯醛( 0.03m L/kg) ,结膜囊内滴0.4%盐酸丁氧普鲁卡因液,眼科ⅣB超(中国医学科学院研制BM 一200型) 测双眼眼轴长度,以手动模式连续测量6次,计算平均值。485868.com_【官方首页】-澳门金沙1.2.3’ ITU N EL标记观察视网膜细胞凋亡深度麻醉处死,立即摘出眼球,用4%多聚甲醛固定24h,自视神经根颞侧l m m 处作矢状切面取材,石蜡包埋,4斗m 连续切片。TU N EL试剂盒购于武汉博士德公司,操作步骤严格按说明书进行。光学显微镜下观察,在TU N EL标记切片的视网膜后极部随机选取10个视野,分别计数视网膜细胞总数及呈阳性着色的凋亡细胞数,取其平均值并计算视网膜细胞凋亡率。免疫组化法测定视网膜Bak及Bcl 一】【1蛋白表达采用兔抗Bak、Bel 一】【l 多克隆抗体(美国选用出生3天的健康花色1.2.2眼轴测量豚鼠· 29·SantaCm z公司) ,SP免疫组化试剂盒( 中杉金桥公司) ,方法参照试剂盒说明,以PBs代替一抗作阴性对照。应用H PIsA一100彩色病理图文分析系统( 同济医科大学千屏公司) 进行图像分析,表达强度以平均灰度值表示。统计学分析采用sPssl l .0统计软件进行数据处理,正态分布数据用( 圣± s) 表示,结果采用t检验和直线相关分析,P<o.05表示差异有统计学意义。1.32结果2.1屈光度及眼轴长度及眼轴长度与对照眼实验前后有统计学差异( P<0.05) 。A、B组遮盖眼屈光度分别为( 一5.33± 3.26) D和( 一9.57± 2.19) D,眼轴长度分别为( 9.36± O .35) m m 和( 10.28± O .31) m m ,两者之间亦有显著性差异( P<0.05) 。2.2视网膜细胞凋亡视网膜内、外核层均可见散在的’ IU N EL染色阳性细胞,细胞核呈颗粒状黄色或棕黄色着色。485868.com_【官方首页】-澳门金沙A组、B组遮盖眼视网膜细胞凋亡率分别为( O .27±O .14) %和( 2.33± 0.37) %,二者差异具有统计学意义( P<0.05) 。对照眼视网膜各层均未见凋亡细胞。2.3视网膜Bak及Bcl —d蛋白表达表达于感光细胞内节、外核层及神经节细胞层,Bcl一】【l 主要表达于视网膜感光细胞内节、外核层、内核层及神经节细胞层,两者阳性着色细胞胞浆均呈棕黄色或黄色。B组遮盖眼视网膜Bak光密度值与A组遮盖眼及对照眼相比差异有统计学意义( P<O .05) 。Bcl —xl 蛋白表达在三者间无明显差异( P>0.05) ,见表1。A、B组遮盖眼屈光度A组、B组遮盖眼后极部Bak主要表1两组Bal 【及Bcl 一】【l 平均灰度值的比较( i ± 5)注:‘与A组遮盖眼及B组对照眼B0k相比。P<o.051.2.42.4Bak和Bcl 一】【l 的表达与凋亡相关性组、B组遮盖眼视网膜凋亡细胞率与Bak蛋白表达强度的相关系数r值分别为0.79、0.84( P<0.05) ;与Bcl 一】【l 蛋白表达强度的相关系数r值分另U为一O .37、一O .3l (P>0.05)。A 万方数据 万方数据 Bak和Bcl-xl在豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜的表达及凋亡Bak和Bcl-xl在豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜的表达及凋亡作者:徐蕾, 张金嵩, 陈悦, XU Lei, ZHANG Jinsong, CHEN Yue作者单位:郑州大学第一附属医院眼科,郑州市,450052刊名:医药论坛杂志英文刊名:JOURNAL OF MEDICAL FORUM年,卷(期): 参考文献(9条)参考文献(9条)2007,28(5) 1.Hartmann A;Michel PP;Troadec JD Is Bax a mitochondrial mediator in apoptotic death of dopaminergicneurons in Parkinson's disease? 2001(06)2.Lam TT;Abler AS;Tso MOM Apoptosis and caspases after ischemia-reperfusion injury in rat retina1999(05)3.Xu GZ;Li WW;Tso MO Apoptosis in human retinal degenerations[外文期刊] 19964.刘双珍;毛俊峰;文丹 Caspase-3抑制剂AcDEVD-CHO对实验性近视眼视网膜细胞凋亡的治疗[期刊论文]-中华眼科杂志 2005(05)5.Levin LA;Schlamp CL;Spieldoch RL Identitlcation of the bel-2 family of genes in the rat retina1997(12)6.Cosulich SC;Worrall V;Hedge PG Regulation of apoptosis by BH3 domains in a cell-free system[外文期刊] 1997(12)7.Kondo S;Shinomura Y;Kanayama S Modulation of apoptosis by endogenous Bcl-xL expression in MKN-45human gastric cancer cells[外文期刊] 1998(20)8.Hague A;Diaz GD;Hicks DJ bcl-2 and bak may play a pivotal role in sodium butyratez-inducedapoptosis in colonic epithelial cells,however overexpression of bcl2 does not protect against bak-mediated apoptosis[外文期刊] 1997(05)9.Ing DJ;Zang J;Dzau VJ Modulation of cytokineinduced cardiac myocyte apoptosis by nitricoxide,Bak,and Bcl-x[外文期刊] 1999(01) 引用本文格式:徐蕾.张金嵩.陈悦.XU Lei.ZHANG Jinsong.CHEN Yue Bak和Bcl-xl在豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜的表达及凋亡[期刊论文]-医药论坛杂志 2007(5)

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